«Ночь в Венеции», как и знаменитая «Летучая мышь» Иоганна Штрауса, – это блестящая комедия положений, основанная на бесконечных обманах, переодеваниях и подменах, что изначально свойственно карнавальному действу, положенному в основу, как самого названия и сюжета, так и жанра спектакля в целом. Скрывая под маской лицо, так легко открыть свою настоящую суть и совершить то, на что не хватает решимости в обычной жизни.
Покоритель женских сердец – неотразимый герцог Гуидо собирается весело провести время вместе с Барбарой, молодой женой почтенного сенатора Делаква. Предчувствуя эту опасную карнавальную затею герцога, престарелый муж решает спрятать красавицу-жену на острове Мурано, отправив её туда под покровом ночи в сопровождении гондольера. При этом сама Барбара любит племянника своего мужа, красавца Энрико, и не собирается ни отвечать взаимностью ловеласу Гуидо, ни покориться воле почтенного супруга. Чтобы выпутаться из этой ситуации, она обращается за помощью к своей сестре – рыбачке Аннине, которая соглашается переодеться в платье Барбары и вместо нее покинуть Венецию в разгар карнавала.